土壤酶活性(soil enzyme activity)是由生物体产生的,具有高度催化作用的一类蛋白质。土壤酶一般吸附在土壤胶体表面或呈复合体存在,部分存在于土壤溶液中,而以测定各种酶的活性来表征。土壤酶活性包括已积累于土壤中的酶活性,也包括正在增殖的微生物向土壤释放的酶活性。它主要来源于土壤中动物、植物根系和微生物的细胞分泌物以及残体的分解物。它在接近常温、常压和中等酸度的条件下,大大加速生物化学反应的速度,并且具有突出的专一性。
序号 | 检测指标 | 样品要求 | 需要过筛类型 | 测试方法 |
1 | 脲酶 | 30g风干样 | 18目/1mm | 苯酚钠-次氯酸钠比色法 |
2 | 磷酸酶 | 30g风干样 | 18目/1mm | 磷酸苯二钠比色法 |
3 | 过氧化氢酶 | 6g风干样 | 18目/1mm | 高锰酸钾滴定法 |
4 | 蔗糖酶 | 6g风干样 | 18目/1mm | 3, 5- 二硝基水杨酸比色法 |
5 | β-葡萄糖苷酶 | 15g鲜样 | 10目/2mm | 对硝基酚比色法 |
6 | 纤维素酶 | 30g风干样 | 18目/1mm | 3, 5- 二硝基水杨酸比色法 |
7 | 脱氢酶 | 15g风干样 | 10目/2mm | TTC比色法 |
8 | 淀粉酶 | 3g风干样 | 30-50目 | |
9 | 酸性转化酶 | 3g风干样 | 30-50目 | |
10 | 羟胺还原酶 | 3g风干样 | 30-50目 | |
11 | 亚硝酸还原酶 | 3g风干样 | 30-50目 | |
12 | 过氧化物酶 | 3g风干样 | 30-50目 | |
13 | 碱性蛋白酶 | 3g风干样 | 30-50目 | |
14 | 中性蛋白酶 | 3g风干样 | 30-50目 | |
15 | 酸性蛋白酶 | 3g风干样 | 30-50目 | |
16 | 硝酸还原酶 | 3g风干样 | 30-50目 | |
17 | 多酚氧化酶 | 3g风干样 | 30-50目 | |
18 | α-葡萄糖苷酶 | 3g风干样 | 30-50目 |
土壤样本的采集及贮存方法
活的微生物是土壤酶的主要来源,土壤酶活性对外界环境的变化十分敏感,为了能有效地反映土壤实际状况,在试验之前采取有效、可靠的取样及贮存方法是研究结果取得成功的前提保障。在土壤样品采集时,首先是根据试验需求确定样地及土层的深度,在所选择的样地中一般是采用五点取样法,然后混合同土层土样,根据试验设计需求设置重复,*少3个重复。对采集的土壤样本立即进行试验分析是较为理想的情况,但在大多数情况下难以实现,因此如何贮存土壤样品,一直以来是土壤酶研究者所关心的问题。
低温贮藏对土壤酶活性的影响
低温贮存是一种常见的土壤样品贮藏方式,关于低温贮藏对土壤酶活性的影响也有较多的研究。低温贮存的影响还与土壤酶种类有关,低温贮存导致了纤维二糖酶和磷酸酶活性的降低,而β-乙酰氨基葡萄糖苷酶和β-葡萄糖苷酶的变化却并不显著。目前,4℃或-20℃贮存土壤样本是较常见的贮存方式。除了考虑常规土壤酶活性测量的影响,对荧光分析法测定的土壤酶活性,低温贮存的影响及理想的贮藏条件研究也同样重要。相关研究发现,4℃或-20℃条件下贮存土壤,不会引起土壤酶活性的显著变化,但随着贮存时间的延长,不同种类的土壤酶活性会发生不同的变化。
风干对土壤酶活性的影响
土壤风干同样是一种常见的土壤样品贮存方式,有关风干土对土壤酶活性影响相关的研究报道有不同的解释。研究发现,虽然风干土样比新鲜土的温度有所提高,但土壤中转化酶、脲酶、蛋白酶、淀粉酶和芳基硫酸酯酶的活性反而有所降低。此外,也有报道指出风干土和新鲜土土壤酶活性差异并不显著。赵颖等分别对大豆地和玉米地中不同生长时期的新鲜土和风干土中的多酚氧化酶、脲酶及蔗糖酶活性进行了检测与分析,结果表明除在种植前期,大多数情况下,土壤中多酚氧化酶、脲酶及蔗糖酶的活性在风干后和新鲜土差异并不显著。研究表明,在21~23℃条件下贮存1年和贮存1周的风干土,土样中脲酶的活性并没有显著的变化。通过试验发现,土壤风干处理后在测定磷酸酶活性时,除了雨天采集的土样,此外对土壤酶活性没有影响,因为在砂土中田间水分含量一般较低。由此来看,土壤的风干过程中对不同种类的酶和不同条件下的同种酶影响趋势并不一致,从土壤酶产生的来源看,可能是因为风干过程导致了某些微生物的死亡,但死亡的微生物则又会释放出某些酶,二者酶的种类可能会不同。也有报道指出,风干过程是否影响土壤酶活性与植物生长状况、土地土壤的管理方式等有关。
总之,不同的贮存方式都会影响到土壤酶活性,其影响程度与土壤类型、土壤酶种类及土壤样品管理等多种因素有关。但总的趋势是土壤样品的贮存降低了大多数土壤的酶活性。土壤样品酶活性的测定*好是在短期内完成,如果需要贮藏可以视贮藏时间、贮藏条件等因素综合分析而定,几周内一般在4℃条件下贮存,其次是在-20℃环境中保存;几个月甚至更长的时间一般选择风干贮藏;而对于某些酶,在发现风干后对其酶活性影响不大的,应尽量选择风干处理,这样既方便又节约;此外,对于同一种酶的分析应尽量在同一天或几天内完成,以在*大程度上降低样品贮存所造成的差异。
研究领域
1、土壤生态系统代谢
2、土壤中元素循环与迁移
3、土壤肥力评价
4、土壤环境质量指示作用的研究
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